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東部馬腦脊髓炎病毒PCR檢測試劑盒反應五要素:參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。③引物堿基:...
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帕臘南病毒PCR檢測試劑盒實驗注意事項:1)RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況;2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號;3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。實時熒光定量PCR(quantitativereal-timePCR,qPCR)是指在PCR反應體系中加入熒光基團,利用熒光信號積累實時監測整個PCR進程,*通...
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麻風分枝桿菌PCR檢測試劑盒實驗流程:1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。4.試劑盒所有試劑在使用前應...
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四角瑞氏絳蟲PCR檢測試劑盒反應流程常規程序:將PCR反應所需的成分配置完后,在PCR儀上于94-96℃預加熱幾十秒至幾分鐘,使模板DNA充分變性,然后進入擴增循環。在每一個循環中,先于94℃保持30秒鐘使模板變性,然后將溫度降到復性溫度(一般50-60℃之間),一般保持30秒鐘,使引物與模板充分退火;在72℃保持1分鐘(擴增1kb片段),使引物在模板上延伸,合成DNA,完成一個循環。重復這樣的循環25~35次,使擴增的DNA段大量累積。在72℃保持3-7min,使產物延伸完...
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番鴨細小病毒PCR檢測試劑盒反應五要素:參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+引物:引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則:①引物長度:15-30bp,常用為20bp左右。②引物擴增跨度:以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。③引物堿基:G+C...
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溶血性曼氏桿菌PCR檢測試劑盒使用方法:一、溶血性曼氏桿菌PCR檢測試劑盒樣品RNA的制備1、用自選方法抽提病毒樣品RNA。注意:可以選用本公司生產的一管式病毒RNAout2、或柱式病毒RNAout。二:RT(逆轉錄)反應合成cDNA1.按下表配制RT反應體系(20μL體系)2.70℃保溫5分鐘變性模板后立即冰浴。3.嚴格按順序加入6μLRTBuffer(含dNTP)和2μLMMLV逆轉錄酶(含RI),反應終體積為20μL。4.42℃保溫60分鐘。此步為RT反應。5.70℃保...
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同詹姆士城峽谷病毒PCR檢測試劑盒注意事項:1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋...
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