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注意事項:產品僅用于科研1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
產品名稱:非滅活型病毒樣本保存液
規格: 2.5L
貨號:BK-P96344
產品運輸:低溫運輸
產品保存:-20℃保存
產品有效期:一年
產品特點:
本產品就是根據保守區設計引物而開發的高靈敏 PCR檢測試劑盒 。
特點優勢:
1. 特異性:所有產品使用的引物均經過詳盡的生物信息學分析,經過TIANDZ及自建龐大數據庫的比對,確保所用的每一條引物均為種屬或血清型特異的基因序列區段,可實現對細菌種屬及血清型的特異檢測,特異性均達到100%。
2. 重現性:該系列所有產品均經過大量實驗菌株的驗證,重現性為100%。
3. 靈敏性:該系列產品可實現對檢測菌的高靈敏檢測,當樣品中細菌的濃度達到103cfu/ml時,可實現對其的直接檢測,無需繁瑣的增菌過程。
4. 實用性:檢測范圍廣,涵蓋了對人體危害較為嚴重的17種呼吸道及腸道致病菌,可實現對臨床樣品及其他環境取樣的快速檢測,整個檢測過程為3-4個小時。
5. 優勢1:序列資源豐富,除TIANDZ公布的序列外,公司還進行了大量菌株的序列破譯,從理論上保證所選引物具有良好的保守性和特異性。
6. 優勢2:該系列試劑盒均經過大量的保守性及特異性實驗驗證,憑借公司擁有的豐富的菌種資源,每一種檢測試劑盒均經過了20余種標準菌株和臨床菌株的保守性驗證及40余種近緣標準菌株和臨床菌株的特異性驗證,確保在使用過程中不會出現任何的假陽性及假陰性報告結果。
使用方法:
一、樣品采集:
1、食品樣品:樣品的采集與預培養按照樣品的采集與預培養按照菌檢驗要求進行。
2、血液樣品:用無菌注射器抽取受檢者靜脈血2mL,注入無菌EDTA2Na(或檸檬酸鈉)抗凝管,立即混勻。
3、糞便樣品:取糞便置于滅菌的收集管中送檢。
4、病灶部位樣品:取發病部位新鮮滲出物、粘液膿血送檢。
一、稀釋 PCR 陽性對照(以 10E2-10E7 拷貝/μL 這 6 個 10 倍稀釋度為例)
1. 注意:由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體樣品做陽性對照,只提供可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 標記 6 個離心管,分別為 7,6,5,4,3,2。
3. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 熒光 PCR 專用模板稀釋液(最好用帶芯槍頭,下同)。
4. 在 7 號管中加入 5 μL 1×10E8 拷貝/μL 的陽性對照,充分震蕩 1 分鐘,得1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
5. 換槍頭,在 6 號管中加入 5 μL 1×10E7 拷貝/μL 的陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用
6. 換槍頭,在 5 號管中加入 5 μL 1×10E6 拷貝/μL 的陽性對照到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 1×10E5 拷貝/μL 的陽性對照。放冰上待用。
7. 重復上面的操作直到得到 6 個稀釋度的陽性對照。放冰上待用。
熒光定量PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝螅?/span>4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
CTAB 50g/100g/500g/1kg Amresco 0833 抗原保護固著液(10%中性Formalin固著液)50毫升
重酸膽堿(>98%,BR)質量規格:>98%,BRCholine bitartrate ELISAKitVWF人血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子規格:48T/96T 去乙?;?/span>Siuin-1(SI1/SIR2L1)ELISA試劑盒 ,英文名: SI1/SIR2L1 ELISA Kit
鉻粒(>99%,BR)質量規格:>99%,BRChromium granular 小鼠核因子κB(NF-κB)ELISA試劑盒 ,英文名: NF-κB ELISA Kit rabbitbasicfibroblastgrowthfactor,bFGFELISA試劑盒兔子堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒規格:96T/48T
鉻粉(>99%,BR)質量規格:>99%,BRChromium powder 大鼠熱休克蛋白糖蛋白96(HSPgp96)ELISA檢測試劑盒RatHeatShockProteinglycoprotein96,HSPgp96ELISAKit 96T/48T Humanai-gasicparietalcellaibody,AGPA/PCAELISA試劑盒人抗網硬蛋白抗體(ARA)ELISA試劑盒規格:96T/48T
氯化鉻六水(>98%,BR)質量規格:>98%,BRChromium(III) chloride, hexahydrate 人酸脫氫酶E1(PDH E1)試劑盒 Human pyruvate dehydrogenase-E1,PDH E1 ELISA Kit HumanC-typenaiureticpeptide,CNPELISAKit人C型尿肽(CNP)ELISA試劑盒規格:96T/48T
外消旋順式-3-羥基格列本脲質量規格:美國進口rac cis-3-Hydroxy Glyburide CLIAKitforVDR(HumanVitaminDReceptor)ELISAKit人維生素D受體規格:48T/96T 大鼠細胞色素C(Cyt-C)ELISA試劑盒 ,英文名: Cyt-C ELISA Kit
磺胺噻唑鈉鹽質量規格:美國進口Sulfathiazole salt 熒光樣品固著液(Michel固著液)50毫升 人α干擾素(IFN-α)ELISA檢測試劑盒HumanIerferonα,IFN-αELISAKit 96T/48T
匹格列酮-d4質量規格:美國進口Pioglitazone-d4 ELISAKitpERK人1酸化細胞外信號調節激酶規格:48T/96T 大鼠Ⅱ型膠原C端肽(CTX-Ⅱ)試劑盒 Rat C-telopeptide of type Ⅱcollagen,CTX-Ⅱ ELISA Kit
羥基匹格列酮(M-Ⅶ)質量規格:美國進口Hydroxy Pioglitazone (M-VII) 小鼠CD3分子(CD3)ELISA試劑盒 ,英文名: CD3 ELISA Kit RVIgM風疹胞病毒IgM(捕獲法二步法)
非滅活型病毒樣本保存液化乙酰膽堿 (-20℃)NA 小鼠白介素16(IL-16)ELISA試劑盒 ,英文名: IL-16 ELISA Kit
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