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本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!
產品名稱 | 規格 | 檢測方法 | 貨號 |
氨基酸(AA)含量測試盒可見分光光度法 | 50管/48樣 | 可見分光光度法 | BK-01S6531 |
商品介紹:
測定意義: 動物肝臟、腎臟是氨基酸代謝的主要器官,故尿中氨基酸的變化最能反應肝、腎的生理狀態。另外,氨基酸還能反應灼傷、傷寒等方面情況。植物體內氨基酸含量對研究植物在不同條件下及不同生長發育時期氮代謝變化、植物對氮素的吸收、運輸、同化及營養狀況等有重要意義。 測定原理: 氨基酸的α-氨基可與水合茚三酮反應,產生藍紫色化合物,在570 nm有特征吸收峰;通過測定570 nm吸光度,來計算氨基酸含量。 自備儀器及用品: 臺式離心機、水浴鍋、紫外分光光度計/酶標儀、1 mL玻璃比色皿/96孔板、可調式移液槍、研缽、無水乙醇、冰和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:
① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。
e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
100mL HEPPSO Buffer,0.2M,pH7.0 HEPPSO Buffer,0.2M,pH7.0 常溫保存
1mL 2X PCR Mix(即用型PCR試劑盒3.0) Instant PCR Kit 3.0 -20℃保存
2 ug pLVX-EF1α-mCherry-N1 pLVX-EF1α-mCherry-N1 低溫運輸,-20℃保存
聯合固氮菌培養基 Combined nitrogen-fixing bacteria medium 250g
2 ug pHT315 pHT315 低溫運輸,-20℃保存
茜素-β-半乳糖苷肉湯(Aliz-gal肉湯) Aliz-gal Broth 100g
10mg apo- 轉鐵蛋白 apo-Transferrin Human 4℃保存
250mL Tris-Acetate Buffer,1M,pH7.0 Tris-Acetate Buffer,1M,pH7.0 常溫保存
1mL 卵白蛋白標準品,2mg/mL Ovalbumin Standard -20℃保存
2 ug pTrcCKS pTrcCKS 低溫運輸,-20℃保存
100mL 紅細胞裂解液C型(核酸純化) 4℃保存
氨基酸(AA)含量測試盒可見分光光度法Transferrin 轉鐵蛋白抗體 規格: 0.1ml
C10orf4/FRA10AC1 10號染色體開放閱讀框4抗體 規格: 0.2ml
UBE2W 泛素蛋白連接W抗體 規格: 0.2ml
Crkl 接蛋白CrkL抗體 規格: 0.2ml
Rabbit Anti-Guinea pig IgM/Gold 膠體金標記的兔抗豚鼠IgM 規格: 2ml
SHANK2 富含脯突觸相關蛋白SHANK2抗體 規格: 0.2ml
Goat Anti-human IgM/PE-CY5 PE-CY5標記的羊抗人IgM 規格: 0.1ml
RSK3/Ribosomal S6 kinase 3 核糖體蛋白S6激家族RSK3抗體 規格: 0.2ml
ARL8B ADP核糖基化樣因子8B抗體 規格: 0.2ml
Phospho-MEK6 (Ser207) 磷酸化絲裂原活化蛋白激MKK6抗體 規格: 0.1ml
ZWINT 著絲粒ZW10相互作用蛋白1抗體 規格: 0.2ml
CD8 CD8抗體 規格: 0.1ml
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