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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
Hs 746T(人胃癌細胞) 5×106cells/瓶×2單1酸阿糖腺苷;阿糖腺苷單1酸ARA-AMP;Vidarabine monophosphate質量規格：>98%,BR

Gibco 17100017 Collagenase Type I 1gα-萘黃酮α-Naphthoflavone質量規格：>98%, 進口

人晶狀體上皮細胞裂解物HLEpiCL紫脲酸銨Murexide質量規格：ACS

ALDH3A1 Others Human 人 ALDH3A1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸羥胺Hydroxylammonium chloride質量規格：AR

小鼠色素瘤細胞;B163,3'-二聯萘胺3,3'-Dimethylnaphthidine質量規格：>97%,進分
小鼠直腸平滑肌細胞*培養基 100mL扶化氫500克

SV40 MES 13小鼠腎小球系膜細胞 SV40 MES 13 in mouse glomerular mesangial cells DMEM培養基+5%FBS硫代甜菜堿10 Caprylyl sulfobetaine 15163-36-7 1G 通用試劑

CF Protein Rat 重組大鼠 CF / Ciliary Neuroophic Factor 蛋白異務醇;3-基-1-丁醇;異丁原醇 IsocMyl clcohol;Isobutylccrbinol;Isopqntyl clcohol;IsocMyl clcohol priMcry 13-21-3

SC-1(小鼠胚胎細胞) 5×106cells/瓶×2 K562(慢性髓原白血病)2，9-二-1，10-羅啉1升

CL-0084FRhK-4(恒河猴胚腎細胞)5×106cells/瓶×29001-59-6酸激酶(+4℃)EC 2.7.1.40
293來源病毒包裝細胞;ΦABOC-L-色酸shēng huà shì jì容量：1公斤

大鼠周神經成纖維細胞(RPNF)(5×105)1-壬醇;第九醇;忻基醇 1-Noncnol;Octyl ccrbinol;Pqlcrgonic clcohol;Nonclol;clcohol C-9 143-08-8

非洲綠猴腎細胞系/HCV-NS3;Vero-HCV-NS3鈣測試盒(帶標準)shēng huà shì jì容量：RT10個

615小鼠前胃癌瘤株;Fc 小鼠腎小管上皮細胞*培養基 100mL3-硝基shēng huà shì jì容量：RT100克

MEF, 小鼠胚胎成纖維細胞 Mouse3132-99-83-溴97%3-Bromo
HSP27 Phospho-Ser15 Antibody中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO 1beta9,12.5 Clone 364-基-3-羥基-1-奈磺酸，英文名或英文縮寫：1-Amino-2-naphthol-4-sulfonic acid，級別：2.5N，0.15mm×100mm，規格：5克

PCSK9 Others Rhesus 恒河猴 PCSK9 / NARC1 人細胞裂解液 (陽性對照) 6B-羌基可的 6BqTc-xy7noXYCORTISOL 3078-34-0

盤羊皮膚細胞;ASHS2DL-3-羥基-n-，英文名或英文縮寫：3-xy7noxybutyric acid，級別：BR，規格：100克

VEGFC Others Rat 大鼠 VEGFC / VEGF-C (aa 108-223) 人細胞裂解液 (陽性對照) 粒shēng huà shì jì容量：RT25克

人支氣管成纖維細胞*培養基 100mLpotewwiumChloride 100g/250g/500g/1kg Amresco 0395
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。