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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | HDAC8 Phospho-Ser39 Antibody |
檢測方法 | 兔多克隆抗體 |
規格 | 50μl |
貨號 | BK-S64584 |
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規則:
大鼠源細胞 Butt's 瘤細胞,NAMALWA細胞 LLC-MK2細胞,綠猴恒河猴腎細胞咪唑煙酸(標準品)質量規格:HPLC>99%,標準品Imazapyr acid
Hela, 人細胞系 Human石膽酸(標準品)質量規格:>97(GC),標準品Lithocholic Acid
ADIPOQ Others Mouse 小鼠 ADIPOQ / ACDC / Adiponectin 人細胞裂解液 (陽性對照) 氧嗪酸鉀質量規格:>98%Potassium Oxonate
鐵硒傳遞蛋白 100xITS氧嗪酸鉀(標準品)質量規格:>98%,標準品Potassium Oxonate
ACVR1 Others Canine 狗 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 人細胞裂解液 (陽性對照) 綿馬酸ABA(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Filixic acid ABA
MANF Others Human 人 MANF / ARMET 人細胞裂解液 (陽性對照) L-胱氨酸L-Cystine質量規格:HPLC≥99%,標準品
前列腺上皮細胞培養基PEpiCM-prfL-半胱氨酸甲酯鹽酸鹽L-Cysteine methyl ester 質量規格:>98%,BR
PRLR Others Mouse 小鼠 PRLR / Prolactin receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 甘氨酸甲酯鹽酸鹽Glycine methyl ester 質量規格:>98%,BR
大鼠支氣管成纖維細胞*培養基 100mLL-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽L-Glutamic acid dimethyl ester 質量規格:0.98
EB (NBL-4)細胞,牛胚氣管細胞 SW 1088[SW-1088; SW1088](人腦星型膠質瘤細胞) CM-H018人成纖維細胞*培養基100mLL-亮氨酸甲酯鹽酸鹽L-Leucine methyl ester 質量規格:0.98
人胚肺二倍體細胞;HEL-1 人胃粘膜上皮細胞*培養基 100mL大豆分離蛋白容量:RT50克
人滑膜細胞RNAHS miRNA5 μg2 2 4 4 5-五溴聯本迷 2,2',4,4',5-PqNTcBROMODIPHqNYL qtqr 60348-60-9
LRRN3 Others Human 人 LRRN3 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 檸檬酸容量:5克
牛胚氣管細胞;EB (NBL-4)Φ60mm細胞培養皿容量:2~8℃5克
A172細胞,膠質母細胞瘤細胞 肝細胞癌,HepG2細胞 人結直腸腺癌細胞;COLO 205300-87-83,5-二異唑,97%3,5-Dimetxylisoxazole
HDAC8 Phospho-Ser39 AntibodyRPE Others Human 人 RPE / RPE2-1 人細胞裂解液 (陽性對照) 脫氫非洛地平Dehydro Felodipine質量規格:美國進口
小鼠瘤細胞;P388D1(IL-1)(R)-(+)-非洛地平(R)-(+)-Felodipine質量規格:美國進口
CC Others Human 人 CC / chymoypsin C 人細胞裂解液 (陽性對照) (S)-(-)-非洛地平(S)-(-)-Felodipine質量規格:美國進口
Calu-6 人退行性癌細胞8-羥基鳥嘌呤鹽酸鹽8-hydroxy Guanine 質量規格:美國進口
PANC-1人胰腺癌細胞 Human pancreatic cancer cell line PANC-1 DMEM+10% FBS煙酰胺鳥嘌呤二核苷酸鈉鹽Nicotinamide guanine dinucleotide salt質量規格:美國進口
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