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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | LIMK2 Phospho-Thr505 Antibody |
檢測方法 | 兔多克隆抗體 |
規格 | 50μl |
貨號 | BK-S64583 |
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規則:
大鼠牙細胞*培養基 100mL子囊霉素質量規格:>97%,BRAscomycin,FK520
PIEC豬髖動脈內皮細胞 PIEC pig iliac artery endothelial cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS子囊霉素(標準品)質量規格:HPLC>99%,標準品Ascomycin,FK520
IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169, His 標簽)阿扎那韋質量規格:≥99.0%Atazanavir
NCTC 1469(小鼠正常肝細胞) 5×106cells/瓶×2 HCT 116(結腸癌細胞)阿卡波糖質量規格:>97%,細胞培養級Acarbose
CL-0408NEC(人食管癌細胞)5×106cells/瓶×2阿卡波糖(標準品)質量規格:HPLC>95%,標準品Acarbose
EGF Protein Mouse 重組小鼠 EGF / Epidermal Growth Factor 蛋白L-苯丙氨酸甲酯鹽酸鹽L-Phenylalanine methyl ester 質量規格:>99%,BR
MKN-28(人胃癌高轉移細胞) 5×106cells/瓶×2 腦微血管內皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)L-(-)-葡萄糖(標準品)L-(-)-Glucose質量規格:>98%,標準品
前列腺上皮細胞培養基PEpiCM7-酮基去氫表雄酮7-Keto-dehydroepiandrosterone質量規格:>98%
SELE Others Rat 大鼠 E-selectin / ELAM-1 / CD62E 人細胞裂解液 (陽性對照) 硝酸銣Rubidium nitrate質量規格:>99%
GES-1 人胃粘膜細胞CHIR-99021 (CT99021.HCl)CHIR-99021 (CT99021) HCl質量規格:>99%,GSK-3α/β抑制劑
CL-0337FO(小鼠骨髓瘤細胞)5×106cells/瓶×24-對乙酰氨基酚硫酸鹽-d3質量規格:美國進口4-Acetaminophen-d3 Sulfate
RN-h, 大鼠海馬趾神經元3-(N-乙酰-L-半胱氨酸-S-基)對乙酰氨基酚鈉鹽質量規格:美國進口3-(N-Acetyl-L-cystein-S-yl) Acetaminophen Salt
人皮膚成纖維細胞;HSAS4 人胎盤絨毛膜細胞*培養基 100mL2-十八1酸單甘油酯質量規格:美國進口2-Oleoylglycerol
人牙周膜成纖維細胞RNAHPLR miRNA5 μg1-月桂酰-3-氯質量規格:美國進口1-Lauroyl-3-chloropropanediol
AK2 Others Human 人 AK2 / Adenylate kinase 2 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 4-丁基苯(>95.0%(GC))質量規格:>95.0%(GC)4-Butylbenzaldehyde
LIMK2 Phospho-Thr505 Antibody壞死因子腺嘌呤核苷(腺苷)(標準品)Adenosine質量規格:HPLC>98%,標準品
人主動脈內皮細胞 (HAEC)( 5×105 ) BRL 3A, 大鼠肝正常細胞 Rattus鹽酸阿地芬寧Adiphenine HCl質量規格:含量> 99%
小鼠瘤細胞;EL4鹽酸阿地芬寧(標準品)Adiphenine HCl質量規格:HPLC>98%,標準品
TFRC Others Mouse 小鼠 TFRC / CD71 / ansferrin Receptor 人細胞裂解液 (陽性對照) 醋酸阿拉瑞林/丙氨瑞林 Alarelin Acetate質量規格:>98%,BR
MCF-7 人癌細胞阿侖1酸鈉Alendronate 質量規格:>99%,USP
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