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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | p90RSK Phospho-Thr348 Antibody |
檢測方法 | 兔多克隆抗體 |
規格 | 50μl |
貨號 | BK-S64564 |
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規則:
大耳山羊肺細胞;LDG-12-環戊[I]菲(>97.0%(GC))質量規格:>97.0%(GC)2-Methylcyclopenta[l]phenanthrene
SFRP1 Others Mouse 小鼠 sFRP1 人細胞裂解液 (陽性對照) 萘[2,3-a]芘(>98.0%(GC))質量規格:>98.0%(GC)Naphtho[2,3-a]pyrene
CL-0055Caov-3(人乳突狀卵巢腺癌細胞)5×106cells/瓶×22-氯吩噻嗪(>98.0%(GC))質量規格:>98.0%(GC)2-Chlorophenothiazine
ANGPT4 Others Human 人 Angiopoietin 4 / ANG4 / ANGPT4 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-氯-4,6-二苯基-1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))質量規格:>98.0%(GC)2-Chloro-4,6-diphenyl-1,3,5-triazine
小鼠腸上皮細胞*培養基 100mL異丁司特質量規格:>98%Ibudilast
NHDF-c 正常人皮膚成纖維細胞(NHDF)來自少年者 x500,000cells 氣管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)曲拉通X-100Triton X-100質量規格:>98%,分子生物學級
婆羅門牛皮膚成纖維樣細胞;BOS-4D-葡萄糖醛酸D-Glucuronic acid質量規格:>98%,進分
DPP4 Others Cynomolgus 食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 人細胞裂解液 (陽性對照) L-別蘇氨酸L(+)-allo-Threonine質量規格:>99%,BR
食管上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)L-醋酸賴氨酸Lysine acetate質量規格:>99%,BR
3T3 swiss細胞,swiss鼠胚胎成纖維細胞 人癌細胞,MB-271細胞 LDH細胞毒性檢測試劑盒LDHL-胱氨酸二甲酯二鹽酸L-Cystine dimethyl ester di質量規格:>97%,BR
A2(人腺樣囊性癌細胞) 5×106cells/瓶×2 小鼠色素瘤細胞;B1696孔不可拆酶標板1毫克 保存:-20℃
人臍靜脈平滑肌細胞RNAHUVSMC miRNA5 μg三溴酚 2,4,6-Tribromophqnol 118-79-6
大鼠海馬趾星形膠質細胞(RAh)(5×105)液體生物防腐劑1克
恒河猴腎細胞;LLC-MK2N-吩嗪鹽25克
KM小鼠網織細胞肉瘤瘤株;LⅡ 小鼠腎上皮細胞*培養基 100mL609-71-22-羥基煙酸2-xy7noxynicotinic acid
p90RSK Phospho-Thr348 AntibodyEB病毒轉化的人B細胞;KMY0923 人腦動脈血管內皮細胞*培養基 100mL西地尼布馬來酸鹽Cediranib Maleate 質量規格:度> 99%
小鼠色素瘤細胞;B16-F1西他列汀Sitagliptin質量規格:>98.5%,BR
CD80 Others Mouse 小鼠 CD80 / B7-1 / CD28LG 人細胞裂解液 (陽性對照) 維達列汀;維格列汀Vildagliptin質量規格:>98.5%,BR
LOVO 人結腸癌細胞維達列汀;維格列汀(標準品)Vildagliptin質量規格:HPLC≥99%,標準品
MCF7 [MCF-7]人癌細胞 MCF7 human breast cancer cell line [MCF-7] 1640+10% FBS鄰乙酰水楊酸/阿司匹林Acetylsalicylic acid質量規格:>99.5%,AR
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