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線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒微量法

簡要描述:線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒微量法公司正在出售的產品:雙岐桿菌生化用基礎培養基 英文名稱:The Biochemical Basis of Bifidobacterium Medium 產品規格:250g 雙歧桿菌培養基 英文名稱:Bifidobacterium Medium 產品規格:250g TPY肉湯 英文名稱:TPY Broth 產品規格:250g TPY液體培養基 英文名稱:TPY

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-27
  • 訪  問  量:539

詳細介紹

實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6583

商品介紹:

測定意義:

CA是線粒體三羧酸循環的個中間產物,由檸檬酸合酶催化乙酰CoA與草酰乙酸合成,其含量是三羧酸循環強度的主要指標之一。

配合測定丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性、乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量,其中(1)丙酮酸含量和丙酮酸脫氫酶活性變化可以反映糖酵解進行程度,(2)綜合分析丙酮酸含量、丙酮酸脫氫酶活性和乙酰CoA含量變化可以反映脂肪酸β-氧化途徑提供的乙酰CoA情況,(3)乙酰CoA含量、檸檬酸合酶活性和CA含量變化可以反映三羧酸循環進行狀況。

測定原理:

CA在檸檬酸裂解酶的作用下,生成α-酮酸(草酰乙酸);在弱酸性條件下,α-酮酸進一步與苯肼反應,生成相應的α-酮酸苯腙;α-酮酸苯腙在330nm處有吸收峰,該波長下吸光度的變化程度可反映出CA的含量。

自備儀器和用品:

可見分光光度計、水浴鍋、可調式移液槍、1mL石英比色皿、研缽和蒸餾水。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

1個 1 uL超微量分光光度計  常溫

100次  胎盤堿性檢測試劑盒 Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存

100mL MES Buffer,0.5M,pH8.0  MES Buffer,0.5M,pH8.0  常溫保存

100次 兩棲和爬行類動物種屬鑒定PCR Mix(線粒體CO1基因) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

2 ug pMA-27s-2 pMA-27s-2 低溫運輸,-20℃保存

磁細菌分離培養基 Media for isolation of magnetotactic bacteria 100g

1瓶 SF767細胞株 SF767 低溫運輸和保存

疊氮葡萄糖肉湯  250g

5g β- 環狀糊精 β-Cyclodextrin 室溫干燥保存

50T 布魯氏菌PCR試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

10mL SDS-PAGE上樣液,5× SDS-PAGE Loading Buffer,5× -20℃保存

線粒體檸檬酸(MCA)含量測試盒微量法LRRC10  富含亮重復蛋白10抗體 規格: 0.2mlDnmt3a  DNA甲基轉移-3α抗體 規格: 0.2ml

Phospho-PDGF Receptor beta (Tyr579)  磷酸化小板源性生因子受體B抗體 規格: 0.1mlCyclin H  周期素H抗體 規格: 0.2ml

IRAK4  白介素-1受體相關激4抗體 規格: 0.2mlAT1R/AGTR1  管緊張素Ⅱ-1型受體抗體 規格: 0.1ml

MMP-9  基質金屬蛋白9抗體 規格: 0.1mlMCM3  微小染色體維持缺陷蛋白3抗體 規格: 0.2ml

Phospho-Btk(Ser180)  磷酸化蛋白酪激ATK抗體 規格: 0.1mlphospho-Gria2 (Ser880)  磷酸化谷受體2抗體 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgG/FITC  FITC標記的兔抗雞IgG 規格: 0.3mlKIF1B  驅動蛋白家族成員1B抗體 規格: 0.2ml

Astrocyte  人星形膠質細胞抗體 規格: 0.2mlSLC16A3/MCT4  單羧酸轉運蛋白3/4抗體 規格: 0.2ml

CD98  CD98重鏈抗原抗體 規格: 0.1mlGNLY/NKG5  顆粒溶素抗體 規格: 0.1ml

Phospho-EGFR (Tyr1101)  磷酸化表皮生因子受體抗體 規格: 0.1ml

Mouse Anti-Goat IgG/FITC  FITC標記的小鼠抗羊IgG 規格: 0.3ml

Exportin 5  核輸出蛋白5抗體 規格: 0.2ml

BECN1L1  Bcl-2同源結構域樣蛋白1抗體 規格: 0.2ml

 


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