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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | β-半乳糖苷酶 EC 3.2.1.23 |
檢測方法 | 詳見說明 |
規格 | 1 KU/瓶 |
貨號 | BK-S64429 |
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規則:
PILRB Others Mouse 小鼠 PILRB1 人細胞裂解液 (陽性對照) 4-氧度酸質量規格:美國進口4-Oxo Etodolac
小鼠內膜上皮細胞*培養基 100mLN-度酸質量規格:美國進口N-Methyl Etodolac
H1650-M3人非小細胞肺癌細胞 H1650-M3 cells in human non small cell lung cancer 1640+10%FBS依維莫司-d4質量規格:美國進口Everolimus-d4
IL10 Protein Human 重組人 IL10 / Ierleukin-10 蛋白D 13223-d4 (氟吡汀代謝產物) 質量規格:美國進口D 13223-d4 (Flupirtine Metabolite)
SK-N-BE(2) (人神經母細胞瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 U937(組織細胞瘤)依匹斯汀質量規格:美國進口Epinastine
人胃腺癌細胞;SGC-7901 [SGC7901]3'-Epi 吉西他濱3'-Epi Gemcitabine (Gemcitabine Impurity)質量規格:美國進口
倉鼠腎細胞;HL-1 骨髓瘤細胞,P3/NSI/1-Ag4-1[NS-1]細胞 3T3/Fas/com細胞,轉基因細胞1'-Epi 鹽酸吉西他濱1'-Epi Gemcitabine 質量規格:美國進口
人胚腎細胞;293 [HEK-293]4-羥基雌激素酮4-Hydroxy Estrone質量規格:美國進口
ACPL2 Others Human 人 ACPL2 人細胞裂解液 (陽性對照) 雌激素酮 β-D-葡萄糖苷酸鈉鹽Estrone β-D-Glucuronide Salt質量規格:美國進口
家豬皮膚細胞;SSC-S1?8,9-脫氫雌激素酮 3-硫酸鈉鹽?8,9-Dehydro Estrone 3-Sulfate Salt質量規格:美國進口
大鼠食管上皮細胞*培養基 100mL草酸氫鉀容量:250克
OVCAR-3人卵巢癌細胞 Human ovarian cancer cell line OVCAR-3 1640+10%FBS2,2,2-三錄基錄加醋酯 2,2,2-Trichloroqthyl xlonofonmctq 17341-93-4
EREG Protein Mouse 重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)鉬粉容量:250克
MC3T3-E1(小鼠胚胎成骨細胞前體細胞) 5×106cells/瓶×2 嬰兒成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)SCCRAM肉湯容量:RT250克
人臍動脈平滑肌細胞1993-7-23.4-二甲氧基本3,4-Dimetxoxybenzoic acid
β-半乳糖苷酶 EC 3.2.1.23大鼠腎動脈平滑肌細胞*培養基 100mL舒巴坦鈉(標準品)Sulbactam 質量規格:HPLC>98%,標準品
H9c2(2-1)大鼠心肌細胞 H9c2 (2-1) in myocardial cells of rats DMEM+10%FBS+1%P/S甘草酸(β型),18beta-甘草酸18-beta-glycyrrheticacid質量規格:>98%
IGF1 Protein Human 重組人 IGF1 / IGF-I 蛋白甘草酸(β型),18beta-甘草酸(標準品)18-beta-glycyrrheticacid質量規格:HPLC>98%,標準品
H4-II-E-C3(大鼠肝癌細胞 ) 5×106cells/瓶×2 小鼠腎小管上皮細胞MREpiCOXOID胰蛋白胨Tryptone 質量規格:BR,進口
視網膜色素上皮細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)β-萘黃酮β-Naphthoflavone質量規格:>99%,進分
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