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異檸檬酸裂解酶(ICL)測試盒紫外分光光度法

簡要描述:異檸檬酸裂解酶(ICL)測試盒紫外分光光度法公司正在出售的產品:GVPC瓊脂基礎添加劑 英文名稱: 產品規格:5支/套 BCYE-CYS瓊脂基礎 英文名稱:BCYE-Cys Agar Base 產品規格:100g L-半胱鹽酸鹽 英文名稱:L- Cysteine hydrochloride 產品規格:0.04g/支*5 可溶性焦鐵 英文名稱:Of soluble iron pyrophosphat

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-27
  • 訪  問  量:690

詳細介紹

實驗方法學:

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點:

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產品名稱:異檸檬酸裂解酶(ICL)測試盒紫外分光光度法

產品規格:50管/48樣

檢測方法:紫外分光光度法

產品貨號:BK-01S6598

產品分類:乙醛酸循環系列
商品介紹:

測定意義:

ICLEC4.1.3.1)主要存在于植物和微生物中,油料作物種子在萌發過程中,通過乙醛酸循環及其他過程將脂肪轉變成碳水化合物。ICL是乙醛酸循環的關鍵酶之一。

測定原理:

ICL催化異檸檬酸降解為乙醛酸和琥珀酸,乙醛酸和NADHLDH的作用下生成乙醇和NAD,NADH340nm下有特征吸收峰,監測340nm吸光度的減小速率可間接反應ICL活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水

所需的儀器和用品:

可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗

樣本和試劑浪費!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進行提取

 

細菌/細胞樣本:

先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項:

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。

2、對照管只需要做一管。

3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?

對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。

若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。

250mg 鏈霉蛋白 E Pronase E 4℃保存

50T 細小病毒B19 PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

10 g  Nicotinamide (Sirt1抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL Factor Xa Protease Digestion Buffer  Factor Xa Protease Digestion Buffer  常溫保存

50mL 即用型封堵液(NC專用)  Southern Blocking Buffer (NC) -20℃保存

2 ug pIRES-neo2 pIRES-neo2 低溫運輸,-20℃保存

姬姆薩染色液  5ml*4

1瓶 LNcap cloneFGC(GFP)細胞株 LNcap cloneFGC(GFP) 低溫運輸和保存

營養瓊脂(NA) Nutrient Agar 250g

150U 半乳糖氧化 Galactose Oxidase  -20℃保存

225ml生理鹽水均質袋 Physiological Saline 10個/包

異檸檬酸裂解酶(ICL)測試盒紫外分光光度法C16orf48  16號染色體開放閱讀框48抗體 規格: 0.2mlFBXL3  FBXL3蛋白抗體 規格: 0.2ml

HDAC8  組蛋白去乙?;?抗體 規格: 0.2mlJMJD1B  組蛋白去甲基轉移JMJD1B抗體 規格: 0.1ml

CD21/EBV receptor  2型補體受體抗體 規格: 0.1mlPhospho-MEK1/2(Ser222)  磷酸化絲裂原活化蛋白激激1/2抗體 規格: 0.1ml

Mouse Anti-human IgM/APC  APC標記的小鼠抗人IgM 規格: 0.1mlTIF1 beta/KAP1/TRIM28  轉錄中介因子Tif1β抗體 規格: 0.1ml

5-HT  5-羥色胺抗體 0.1mlBZW2  BZW2蛋白抗體 規格: 0.2ml

Phospho-Met(Tyr1349)  磷酸化肝細胞生因子受體(原基因)抗體 規格: 0.1mlDystrophin/DMD  肌營養不良蛋白 規格: 0.1ml

LSAMP  大腦邊緣系統相關膜蛋白抗體 規格: 0.2mleIF3F  真核翻譯起始因子3F抗體 規格: 0.1ml

UBL7  泛素樣蛋白7抗體 規格: 0.2mlGTPBP10/Claudin12  緊密連接蛋白12抗體 規格: 0.2ml

LRCH3  富含亮重復家庭蛋白3抗體 規格: 0.2mlHtrA2/Omi  線粒體絲蛋白抗體 規格: 0.2ml

JMY  連接介導調節蛋白抗體 規格: 0.2mlMouse Anti-human IgG/Gold  膠體金標記的小鼠抗人IgG 規格: 2ml

JAK2  蛋白質酪激JAK2抗體 規格: 0.1mlSDH/Sorbitol Dehydrogenase  脫抗體 規格: 0.1ml

ST14/MTSP1  絲蛋白14/膜型絲蛋白1抗體 規格: 0.2mlTRAF3/CD40bp  瘤壞死因子受體相關蛋白3抗體 規格: 0.1ml 

 


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