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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | DAB顯色試劑盒20× |
檢測方法 | 詳見說明 |
規格 | 20ml、60ml |
貨號 | BK-S64199 |
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測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規則:
HCST Others Human 人 HCST / DAP10 人細胞裂解液 (陽性對照) 丙二酸鈉質量規格:>98% malonate
人脈絡叢上皮細胞HCPEpiC1酸二氫鈉二水質量規格:>98.5%,分子生物學級 phosphate, monobasic, dihydrate
DMF7細胞,雙位點HC-KIT受體細胞株 人癌高轉移細胞,MDA-MB-435細胞 間充質干細胞培養基MSCM-sf醋酸戈那瑞林質量規格:>98%,單醋酸鹽Gonadorelin Acetate
牦牛皮膚細胞;BMU-S1鹽酸格拉司瓊質量規格:>99.0%,BRGranisetron HCl
F11R Others Human 人 JAM-A 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸格拉司瓊(標準品)質量規格:HPLC>98%,標準品Granisetron HCl
大鼠骨骼肌成肌細胞;L6芬苯達唑;苯硫咪唑質量規格:>99%Fenbendazole
CD274 Others Cynomolgus 食蟹猴 PD-L1 / B7-H1 / CD274 人細胞裂解液 (陽性對照) 芬苯達唑;苯硫咪唑(標準品)質量規格:HPLC>98%,標準品Fenbendazole
T-111A木瓜蛋白酶(含10mL酶解緩沖液)1mL鹽酸司來吉蘭質量規格:>98%,MAO-B selective inhibitorSelegiline HCl
HB細胞,人口腔癌細胞 人臍靜脈血管內皮細胞,HUVEC(原代)細胞 大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞;RBL-13-氮雜雙環【3.3.0】辛烷鹽酸鹽質量規格:>98%3-Azabicyclo (3.3.0) Octane HCL
C127(小鼠癌細胞) 5×106cells/瓶×2鹽酸舍曲林質量規格:>98.5%Sertraline HCL
J774A.1 小鼠巨噬細胞N-(乙酰氨基)亞氨基二乙酸二鈉鹽質量規格:>98%ADA di salt
CM-H107人軟骨細胞*培養基100mLADA;N-(2-乙酰胺基)-2-亞氨基二乙酸質量規格:>99%ADA
Hep G2, 人肝癌細胞系(2S)-2-N-芴甲氧羰基氨基-2--6-庚1酸質量規格:>97%(S)-N-Fmoc-2-(4'-pentenyl)alanine
人癌細胞;MCF7 人角膜上皮細胞*培養基 100mL潑尼龍1酸鈉質量規格:>97%,USPPrednisolone phosphate
人正常細胞;Hs 578BstA66,p110α抑制劑質量規格:>98%,BRA66
DAB顯色試劑盒20×人細胞;Hela硫酸特布他林(標準品)TERBUTALINE SULFATE質量規格:含量測定
APOL1 Others Human 人 APOL1 / apolipoprotein L1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 麥芽三糖(標準品)MALTOTRIOSE質量規格:供檢查用
CL-0421RAG(小鼠腎腺癌細胞)5×106cells/瓶×2鹽酸丙卡特羅(標準品)Procaterol HCl質量規格:含量測定
人羊膜上皮細胞 雙位點HC-KIT受體細胞株,DMF7細胞 BLO-11(小鼠骨骼成纖維細胞)泛酸鈉(標準品) D-pantothenate 質量規格:含量測定
人胰腺腺泡上皮癌;HPAC尼達尼布;BIBF 1120Nintedanib (BIBF1120)質量規格:三重血管激酶抑制劑
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