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儀器:
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀(比色測定波長為550nm)
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 (孵育溫度為37℃)
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理:
血清(漿)可直接測定。
紅細胞:需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本:可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液,離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織:常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理:參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。
產品名稱 | 超微量ATP酶測試盒測Ca2+Mg2+-ATP酶 |
檢測方法 | 比色法 |
規格 | 50管/25樣 100管/50樣 |
貨號 | BK-S63917 |
測定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后,應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發,板上應加蓋,或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實驗臺上,以便 不時觀察,待對照管顯色適當時,即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟,但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺,在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果,準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測紅細胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好:試劑盒2~8℃存放6個月有效。
5、再現性好:變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗: X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少,重復性強。
8、測試面廣:可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等,效果均佳。
實驗通用規則:
CD58 Others Human 人 LFA-3 / CD58 人細胞裂解液 (陽性對照) 澤瀉醇A醋酸酯質量規格:HPLC≥98%,標準品Alisol A 24-acetate
人間充質干細胞-脂肪裂解物HMSC-ad L澤瀉醇C-23-醋酸酯;澤瀉醇C單乙酸酯質量規格:HPLC≥98%,標準品Alisol C monoacetate
ER-30細胞,人癌細胞 大鼠腺癌細胞系,MADB106細胞 成纖維細胞Many types of cells包裝:5 × 105方(1ml)香紫蘇內酯(標準品)質量規格:HPLC≥98%,標準品Sclareolide
B16-F1(小鼠色素瘤細胞) 5×106cells/瓶×2香紫蘇內酯質量規格:GC≥98%,BRSclareolide
NHEM.f M2 Pellet 正常人表皮素細胞團塊(少年者),培養在M2培養液中 > 1 mio.cells 人氣管上皮細胞裂解物HTEpiCL3,4,5-氧基肉桂酸(>98%,BR)質量規格:>98%,BR3,4,5-Trimethoxycinnamic acid
DKK1 Protein Rhesus 重組恒河猴 DKK-1 / Dkk1 蛋白 (256 Asn/Gln, Fc 標簽)dAMP-Na2;脫氧腺苷1酸二鈉質量規格:>98,BR2-Deoxyadenosine-5-Monophosphate Di salt(dAMP-Na2)
人胚肺成纖維細胞;HFL1 人成纖維細胞*培養基 100mLATP.Na2; 腺苷-5’-三1酸二鈉鹽水合物質量規格:>98%,BR,可用于細胞培養,三水合物5'-ATP-Na2
EB病毒轉化的人B細胞;KMY0909美西林/氮脒青霉素質量規格:>95%,BRMecillinam
人口腔角質細胞(HOK)( 5×105 )甲羥孕酮/安宮黃體素質量規格:>98%,BRMedroxyprogesterone
CL-0407NCTC 1469(小鼠正常肝細胞)5×106cells/瓶×2甲羥孕酮(標準品)質量規格:>98%,標準品Medroxyprogesterone
豹貓肺成纖維樣細胞;LCL1Adipicacid1,6-己二酸250毫克PH=7
人APP-PS1(C410Y)雙基因轉染細胞株;7WCY1.0 食管癌細胞,TE-1細胞 PK-15細胞,豬腎細胞系本磺醋內 Bqnzqnq sulfonic ccid wo7ium sclt;wo7ium bqnzosulfonctq 212-4-4
人成纖維細胞;HFFGlutaricacid1,3-二羧酸1克PH4,7,9
HA Others H8N4 甲型流感 H8N4 (A/piail duck/Alberta/114/1979) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-Pyridinamine鄰基5克高,98%
人神經細胞HM(三聚清胺)
超微量ATP酶測試盒測Ca2+Mg2+-ATP酶人臍靜脈平滑肌細胞分子篩, 5 Å(40-60目,氣相、液相色譜柱)Molecular sieves, 5 Å質量規格:40-60目,氣相、液相色譜柱
人臍靜脈內皮細胞;HUV-EC-C 人甲狀腺濾泡上皮細胞*培養基 100mL分子篩, 5 Å(60-80目,氣相、液相色譜柱)Molecular sieves, 5 Å質量規格:60-80目,氣相、液相色譜柱
人胚肺成纖維細胞;IMR-90分子篩, 5 Å(80-100目,氣相、液相色譜柱)Molecular sieves, 5 Å質量規格:80-100目,氣相、液相色譜柱
COLEC12 Others Rat 大鼠 CLP1 / COLEC12 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 分子篩, 5 Å(干燥劑用)Molecular sieves, 5 Å質量規格:干燥劑用
CL-0323BNL 1ME A.7R.1(小鼠肝上皮細胞)5×106cells/瓶×2分子篩, 5 Å(pellets,3-5 mm)Molecular sieves, 5 Å質量規格:pellets,3-5 mm
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