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儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
CD27 Others Human 人 CD27 / TNFRSF7 人細胞裂解液 (陽性對照) 素粉質量規格：>98%,進分Tetrodotoxin

小鼠腦脊神經元MN-rAC-DC亞1酰胺單體質量規格：>97%,BRAc-dC Phosphoramidite

LGMN Others Sus scrofa (Pig) 野豬 (Pig) Legumain / LGMN / AEP 人細胞裂解液 (陽性對照) 2,2'-脫水-5-尿苷質量規格：>97%,BR2,2'-Anhydro-5-Me-U

人胚腎細胞;293 [HEK-293]7-DEAZA-7--2'-脫氧鳥苷質量規格：>97%7-Deaza-7-I-2’-dG

正常大鼠腎細胞;NRK-52E 胸膜細胞瘤，SMC-1細胞 RIN-m細胞，褐鼠瘤上皮細胞和厚樸酚質量規格：≥98%,BRHonokiol
EB病毒轉化的人B細胞;KM9803氫氧化鋁(>98%,BR)質量規格：>98%,BRAluminum hydroxide

CD59 Others Rat 大鼠 CD59 / CD59A / MAC / IP 人細胞裂解液 (陽性對照) 1酸銨三水(>98%,BR)質量規格：>98%,BRAmmonium phosphate, tribasic , trihydrate

人內膜上皮細胞*培養基 100mL雷帕霉素/西羅莫司（標準品）質量規格：HPLC>98%,標準品Rapamycin(Sirolimus)

FO細胞，小鼠骨髓瘤細胞 3T6-Swiss albino(胚胎成纖維細胞) 人臍靜脈內皮細胞(人膀胱癌細胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]甲磺酸雷沙吉蘭質量規格：>98.5%Rasagiline Mesylate

CXCL9 Protein Mouse 重組小鼠 CXCL9 / MIG / C-X-C motif chemokine 9 蛋白白藜蘆醇質量規格：>97.0%,BRResveratrol
CD93 Others Human 人 CD93 / C1QR1 人細胞裂解液 (陽性對照) 豬血紅蛋白容量：RT25克

MG-63 人成骨肉瘤細胞5--1-基四氮坐 98% 5-Mqrccpto-1-mqthyltqtrczolq 13183-79-4

SK-MES-1人肺鱗癌細胞 SK-MES-1 human lung squamous carcinoma cells MEM培養基(GIBCO)+10%FBS硬脂酸容量：5克

EPO Protein Rat 重組大鼠 Erythropoietin / EPO 蛋白 (His 標簽)羧瓊脂糖凝膠CL-6B5克

SV40T轉化的人胚腎細胞(亞系);293T/17 人呼吸道上皮細胞*培養基 100mL(假單胞桿菌分離瓊脂)
銅－ATP酶Cu2+－ATPase測試盒人膀胱癌細胞;5637(HTB-9)番瀉苷C（標準品）Sennoside C質量規格：HPLC≥98%，標準品

HA Others Influenza B 乙型流感 (B/Florida/4/2006) 血凝素HA2 (Hemagglutinin) 人細胞裂解液 (陽性對照) 番瀉苷D（標準品）Sennoside D質量規格：HPLC≥98%，標準品

MDA-MB-435S 人導管癌細胞二氫辣椒堿（標準品）Dihydrocapsaicin質量規格：HPLC≥98%，標準品

A549人非小細胞肺癌細胞 A549 cells in human non small cell lung cancer F-12K+10% FBS五味子酯乙（標準品）Schizandrol B質量規格：HPLC≥98%，標準品

MDK Protein Human 重組人 Midkine / MDK 蛋白柴胡皂苷B1（標準品）SaikosaponinB1質量規格：HPLC≥98%，標準品
實驗通用規則：
1、洗液不夠時，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后，可將酶標板在桌子上平行輕輕晃動30秒，混勻液體。也可以用酶標儀的晃動功能。
3、底物有一定的毒性，終止液對皮膚有腐蝕性，應盡量避免接觸。
4、檢測前，要打開酶標儀，使之穩定10分鐘以上。
5、吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
6、將液體加到酶標孔中時，避免槍頭和孔內液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會自然流下去。
7、溫浴時，要用不干膠或膠帶紙封好酶標板，防止水分的蒸發。
8、洗板時，每次洗液加入后，應靜置1分鐘，使清洗更加*。沒有洗板機時，倒去液體后，要將酶標板在報紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時速度不能太快，以免產生氣泡而使吸取量不準確。
10、底物是光敏感的，要在臨用前現配。