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實驗方法學:
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉動,每隔5~10分鐘轉動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實驗室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點:
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒:本產品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產品名稱:土壤汞(SHg)濃度測試盒可見分光光度法
產品規格:50管/48樣
檢測方法:可見分光光度法
產品貨號:BK-01S6808
產品分類:離子系列
商品介紹:
測定意義: 土壤汞污染能夠通過食物鏈傳遞和富集,對植物、動物和人類健康產生威脅。礦山開發、工業加工、農業生產和生活垃圾常常造成土壤汞污染,因此評價和防止土壤重金屬污染常常需要測定土壤汞含量。 測定原理: 土壤經消化后,汞以Hg2+離子形式存在;Hg2+能與二硫腙生成橙色絡合物,溶于后,在490nm測定吸光度,即可計算S-Hg含量。 自備儀器和用品: 紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋、可調式移液槍、100目篩(可更?。?、濃硫酸、濃鹽酸、濃硝酸和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實驗前選取 2 個樣本做預測定,了解本批樣品情況,熟悉實驗流程,避免實驗
樣本和試劑浪費!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進行提取
| ② 細菌/細胞樣本: 先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;取約 500 萬細菌或細胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細菌/細胞數量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
注意事項:
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現配現用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應時間不夠,可以延長反應時間(反應時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應倍數。
若出現測定管大于對照管,可能是樣本中雜質的影響太大,為了降低雜質的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通??梢允箿y定正常。計算公式中乘以相應稀釋倍數。
1瓶 Caco-2細胞株 Caco-2 低溫運輸和保存
50mL RNb-Mercaptoethanol (2) 常溫
800U Bst DNA聚合,大片段 Bst DNA Polymerase,Large Frag. -20℃保存
500mL Phospho-Protein Extraction Buffer IV Phospho-Protein Extraction Buffer IV 常溫保存
0.1mL×10 Rosetta-gami (DE3) pLysS 感受態細胞 Rosetta-gami (DE3) plysS Competent Cell -80℃保存
2 ug pOPRSVI pOPRSVI 低溫運輸,-20℃保存
細菌生化鑒定管
1瓶 UACC812 [UACC-812]細胞株 UACC812 [UACC-812] 低溫運輸和保存
沙門氏志賀氏增菌液 Salmonella Shigiella Enrichment 250g
25g D- 半乳糖 D(+)- Galactose 室溫保存
天然礦泉水檢驗
土壤汞(SHg)濃度測試盒可見分光光度法AFP 甲胎蛋白AFP抗體 規格: 0.1mlRanBP3 RAN結合蛋白3抗體 規格: 0.2ml
Mouse Anti-Bov IgG/FITC FITC標記的小鼠抗牛IgG 規格: 0.3mlphospho-P53(Ser15) 磷酸化瘤抑制基因P53抗體 規格: 0.1ml
GSK-3β (NT) 糖原合激-3β抗體 規格: 0.2mlSox9a 轉錄因子sox9a抗體 規格: 0.2ml
Caspase 4 半胱胺酸蛋白蛋白-4抗體 規格: 0.1mlFAHD2A 延胡索酰乙酰乙酸水解抗體 規格: 0.2ml
Donkey Anti-rabbit IgG 驢抗兔IgG 規格: 1mgPhospho-Cyclin B1(Ser147) 磷酸化周期素B1抗體 規格: 0.1ml
GAPDH 3-磷酸甘油醛脫(兔來源免疫組化用抗體) 規格: 0.1mlOTUB1 泛素特異性蛋白OTB1抗體 規格: 0.2ml
hnRNP F 異質核糖核蛋白F抗體 規格: 0.2mlGPA33 糖蛋白A33抗體 規格: 0.2ml
phospho-GATA6(Tyr271) 磷酸化GATA結合蛋白6抗體 規格: 0.1mlDAB2IP Dab2相互作用蛋白抗體 規格: 0.2ml
TNFAIP3 瘤壞死因子α誘導蛋白3抗體 規格: 0.2mlCECR1/ADGF 貓眼綜合征染色體候選基因1抗體 規格: 0.2ml
TRIM3/RNF22 環指蛋白22抗體 規格: 0.2mlPGBD1/Cerebral protein 4 腦蛋白4抗體 規格: 0.2ml
phospho-P70 S6 Kinase beta (Ser371) 磷酸化核糖體S6蛋白激抗體 規格: 0.1mlHOXC9 同源盒蛋白HOXC9抗體 規格: 0.2ml
BPIL2 殺菌/通透性增加蛋白樣2抗體 規格: 0.2ml
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