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土壤酸性磷酸酶(SACP)測試盒可見分光光度法

簡要描述:土壤酸性磷酸酶(SACP)測試盒可見分光光度法公司正在出售的產品:葡萄糖酪胨瓊脂進口、國產Dextrose Casein-peptone Agar用于食品中臘樣芽胞桿菌鑒定和計數(APHA方法)250D-環絲 進口、國產加入250ml TSC瓊脂基礎中0.1g/支*2產芽孢肉湯 進口、國產Sporulation Broth用于產氣莢膜梭菌的產芽孢培養250B 進口、國產Polymyxi

  • 產品型號:
  • 廠商性質:經銷商
  • 更新時間:2023-12-25
  • 訪  問  量:384

詳細介紹

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數據!

產品名稱

規格

檢測方法

貨號

土壤酸性磷酸酶(SACP)測試盒可見分光光度法

50管/48樣

可見分光光度法

BK-01S6837

商品介紹:

測定意義:

土壤磷酸酶是一類催化土壤有機磷化合物礦化的酶,其活性的高低直接影響著土壤中有機磷的分解轉化及其生物有效性,是評價土壤磷素生物轉化方向與強度的指標。土壤磷酸酶受到土壤碳、氮含量、有效磷含量和pH顯著影響。通常按照其最適pH范圍,分為堿性、中性和酸性三種類型磷酸酶。

測定原理:

堿性環境中,S-AKP/ALP催化磷酸苯二鈉水解生成和,通過測定酚的生成量即可計算出S-AKP/ALP活性。

自備儀器和用品:

紫外分光光度計/酶標儀、微量玻璃比色皿/96孔板、臺式離心機、37℃恒溫培養箱、分析天平、可調式移液器、冰、蒸餾水、無水乙醇和甲苯。

試劑組成和配制:

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
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實驗結果判斷我有妙招:

1、定量測定結果根據標準曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩定試劑的分類及要求:

① 易揮發、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發生反應的物質要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。

 

操作步驟:

1. 樣品的準備:

a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經足夠用于后續檢測。

e. 根據蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。

2. 試劑盒的準備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據待檢測樣品(包括標準品) 數量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。

b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現配現用。

c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現稀釋現使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

10ku 超氧化物歧化,人 Superoxide Dismutase -20℃保存

250mL Sodium Bicarbonate Buffer(鈉緩沖液),0.5M,pH8.0   Sodium Bicarbonate Buffer,0.5M,pH8.0   常溫保存

1 管 Rosetta-gami(DE3)大腸桿菌 Rosetta-gami(DE3) E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRSET C pRSET C 低溫運輸,-20℃保存

250mL 固相RNase清除劑 Surface RNase Erasol 常溫

2 ug pcDNA6-Flag pcDNA6-Flag 低溫運輸,-20℃保存

麥芽汁 Malt Extract Medium 250g

5g 中性紅 Neutral Red 室溫保存

50T 芹菜PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

1 mg Fura-2 AM(鈣離子熒光探針) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

250mL BSA Blocking Buffer in PBS  BSA Blocking Buffer in PBS  常溫保存

土壤酸性磷酸酶(SACP)測試盒可見分光光度法GERP/TRIM8/RNF27  環指蛋白27抗體 規格: 0.2mlClassical swine fever virus, CSFV  豬瘟毒抗體 規格: 0.2ml

PID1  磷酸相互作用結構域蛋白1抗體 規格: 0.2mlAngiotensin III  管緊張素III抗體 規格: 0.2ml

CDK5RAP3  周期素依賴性激5激活結合蛋白C53抗體 規格: 0.2mlHSP47  熱休克蛋白-47抗體 規格: 0.1ml

Defensin β1  防御素β1抗體 規格: 0.1mlDC-SIGNR/CD299  CD299抗體 規格: 0.2ml

C12ORF63  12號染色體開放閱讀框63抗體 規格: 0.2mlPhospho-INPPL1(Tyr1135)  肌醇聚磷酸鹽磷酸樣蛋白1抗體 規格: 0.1ml

ZNF268  鋅指脂蛋白抗體 規格: 0.1mlUBE2D1  泛素蛋白連接D1抗體 規格: 0.2ml

STAU2  雙鏈RNA結合蛋白Staufen2抗體 規格: 0.2mlphospho-PP2A alpha/beta(Tyr119)  磷酸化蛋酸2A(PP2Aα)抗體 規格: 0.1ml

Rabbit Anti-human IgG  兔抗人IgG 規格: 1mgCYP1A1  細胞色素P450 1A1抗體 規格: 0.1ml

C6orf150  6號染色體開放閱讀框150抗體 規格: 0.2mlCOMP/EPD1/THBS5  軟骨寡聚基質蛋白抗體 規格: 0.1ml

PI 3 Kinase p85 beta  磷脂酰肌醇激p85β抗體 規格: 0.1mlGSTA3  S轉移A3抗體 規格: 0.1ml

phospho-CPI17 alpha (Thr38)   磷酸化蛋酸激PKC/CPI-17抗體 規格: 0.1mlRabbit Anti-Biotin  兔抗抗體IgG 規格: 0.2ml

Dysferlin  Dysferlin蛋白抗體 規格: 0.1ml

 


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