詳細介紹
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環次數;5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產物;9.PCR反應體系與反應條件。
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
瓜納瑞托病毒PCR檢測試劑盒價格 | Guanarito Virus(GTOV)RTPCR | BK-P9218 |
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經過n個熱循環擴增,擴增產物中所含特定基因數是原始模板數的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
?
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
;Digoxin CAS * 規格: 20mg
大葉茜草素;Rubimaillin CAS 55481-88-4 * 規格: 20mg
大薊苷;pectolinarin CAS 28978-02-1 * 規格: 20mg
重樓皂苷II;Chonglou Sapo CAS 76296-72-5 * 規格: 20mg
丙二酸;Malonic acid CAS 141-82-2 * 規格: 20mg
白果新酸;Ginkgolic Acid CAS 20261-38-5 * 規格: 20mg
阿多弗林堿; CAS * 規格: 10mg
克倫特羅;純品型;標準品-瘦精;有 CAS 21898-19-1 * 規格: 0.1g
醇;純品型;標準品;有證書 CAS 55219-65-3 * 規格: 0.1g
丙炔;純品型;標準品;有證書 CAS 103361-09-7 * 規格: 0.1g
磺胺草;純品型;標準品;有證書 CAS 72178-02-0 * 規格: 0.1g
四唑;純品型;標準品;有證書 CAS 112281-77-3 * 規格: 0.1g
蚜磷;純品型;標準品;有證書 CAS 2595-54-2 * 規格: 0.1g
;純品型;標準品;有證書 CAS * 規格: 0.1g
靈;純品型;標準品;有證書 CAS 101-21-3 * 規格: 0.25g
瓜納瑞托病毒PCR檢測試劑盒價格2-氟-3-吡 222.99 2- f -3-*:113975-22-7分子量: C5H3FIN
溴(二水) 591.74 Potassium bromide (two water)*:14323-32-1分子量: K[AuBr4].2H2O
磺胺吡 249.29 Pyridine*:144-83-2分子量: C11H11N3O2S
2,6-雙(2-并咪唑)吡 311.35 Double 2,6- (2- benzimidazole) pyridine*:28020-73-7分子量: C19H13N5
五味子甲素 A vegetarian 416.50728分子量:C24H32O6*:61281-38-7
1-丁-3-甲吡溴物 230.15 1- butyl -3- methyl pyridine bromide*:26576-85-2分子量: C10H16BrN
2-溴-4-硝咪唑 191.97 2溴- 4 -硝咪唑*:65902-59-2分子量: C3H2BrN3O2
丙考達唑 190.2 The expression of C*:23249-97-0分子量: C10H10N2O2
2,3,5-三溴吡 315.79 2,3,5- three*:75806-85-8分子量: C5H2Br3N
1,4-雙(5--2-惡唑)(POPOP) Double 1,4- (5- phenyl -2- oxazole) benzene (POPOP) 364.4分子量: C24H16N2O2*:1806-34-4
氯聚丙 Chlorinated polypropylene 分子量:*:68442-33-1
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發現,DNA在高溫時也可以發生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發現耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
產品咨詢
聯系我們
上海帛科生物技術有限公司 公司地址:上海嘉定區嘉羅公路1661 號24棟 技術支持:環保在線掃一掃 更多精彩
微信二維碼
網站二維碼