SETD7試劑盒檢測程序:
1. 加樣:每孔各加入標準品或待測樣品(已激活) 100ul ,將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板:用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次,向濾紙上印干。
3. 每孔中加入第一抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
結果計算與判斷
1. 所有 OD 值都應減除空白值后再行計算。
2. 以標準品20 00 、100 0 、500 、 250 、 125 、 62.5 、 31.2 、 0 pg /ml 為橫坐標, OD 值為縱坐標,在坐標紙上作圖,畫出標準曲線。
3. 根據樣品 OD 值在該曲線圖上查出相應 E2F1 含量 ,再乘上稀釋倍數即可 。
試劑盒性能
1. 靈敏度 : 最小的E2F1 檢測濃度小于 15 pg/ml。
2. 特異性: 可同時檢測重組或天然的人 E2F1 。 不與 人其它細胞因子有交叉反應。
3. 重復性:板內、板見變異系數均小于8.9%。
小鼠肝癌細胞;Hepa 1-6 [Hepa1-6]
小鼠肥大細胞瘤細胞;P815
小鼠胚胎成纖維細胞;3T6-Swiss albino
小鼠胚胎成纖維細胞;C3H 10T1/2 2A6
小鼠樹突狀細胞肉瘤細胞;DCS
小鼠淋巴瘤細胞;EL4
小鼠前胃癌細胞;MFC
小鼠單核巨噬細胞白血病細胞;RAW 264.7 [RAW264.7
小鼠胚胎成纖維細胞;3T3-L1
小鼠乳腺癌細胞;CCC-Ca761-03
小鼠胚胎成纖維細胞;BALB/C 3T3
小鼠淋巴細胞白血?。籐1210
小鼠肺腺癌細胞系;LA795
C3H/An小鼠結締組織細胞(L929-TK-);LTK-
小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH2
小鼠B淋巴細胞雜交瘤細胞;SH3
倉鼠/小鼠雜交瘤細胞;145-2C11
小鼠黑色素瘤細胞;B16
小鼠T淋巴細胞;Cl.Ly1+2-/9
小鼠單核巨噬細胞;J774A.1
小鼠腎集合管細胞(SV40轉化);M-1
綠色熒光蛋白標記小鼠前胃癌細胞;MFC-GFP
小鼠腎足細胞;Mouse podocyte
小鼠淋巴瘤細胞;P388D1(IL-1)
小鼠子宮頸癌細胞;U14
綠色熒光蛋白標記小鼠子宮頸癌細胞;U14-GFP
小鼠漿細胞瘤;MPC-11
小鼠胚胎成纖維細胞;PA317
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